固相ペプチド合成によるスタフィロコッカスヌクレアーゼのヒスチジン残基46の役割に関する研究

スタフィロコッカスヌクレアーゼの残基6から47および9から47に対応する合成ポリペプチド、およびヒスチジン残基46の代わりにグリシンを含む同じ配列（6–47, Gly46および9–47, Gly46）をメリフィールド固相法によって合成した。通常のヒスチジンを含む配列とGly46類似体は、残基49または50から149を含む天然ペプチド（P3）とエクイモラルに混合した場合、DNaseおよびRNase活性の類似レベルを生成した。すべての合成ペプチドの原始的状態での活性は、天然P2（残基6から48）と天然P3の等モル混合物によって形成される非共有複合体（天然ヌクレアーゼ-T）によって与えられるものの約4%から5%であった。アナログおよび通常のペプチドのために生成された活性の半合成ヌクレアーゼ-T種は、活性だけでなく、トリプシン消化に対する抵抗性および蛍光放射特性においても類似していた。6–47および6–47, Gly46によって生成された半合成ヌクレアーゼ-T種は、デオキシチミジン3',5'-二リン酸およびCa++の存在下でのトリプシン消化後、ホスファセルロースクロマトグラフィーによって精製された。このように精製された両方の形態は、天然ヌクレアーゼ-Tの約50%から60%のDNase活性を示した。結果は、ヒスチジン残基46が酵素活性やヌクレアーゼおよびヌクレアーゼ-Tの特徴的なその他の特性にとって必須ではないことを示している。