大きなおよび小さなプラスミドの検出と分離のための迅速手順

アグロバクテリウム、リゾビウム、エシェリヒア、サルモネラ、エルウィニア、シュードモナス、ザンソモナスの種に保持されているさまざまなサイズ（2.6から350メガダルトン）のプラスミドの検出と分離のための手順が説明されています。この方法は、アルカリ性ナトリウムドデシル硫酸（pH 12.6）を用いて染色体DNAを変性させる条件下で細胞から放出される共価的に閉じた環状デオキシリボ核酸（DNA）の分子特性を利用しました。タンパク質と細胞残骸は、フェノール-クロロホルムで抽出することにより除去されました。これらの条件下で、染色体DNA濃度は低下または除去されました。澄明な抽出物は直接電気泳動分析に使用されました。これらの手順により、ニック翻訳、制限内因性ヌクレアーゼ分析、形質転換、DNAクローニング実験に直接使用できるプラスミドDNAの選択的分離も可能になりました。