大腸菌におけるビタミンB12の輸送

大腸菌K-12λの細胞によって60Coラベルのシアノコバラミン（ビタミンB12）の取り込みは、最初の急速な相（<1分で完了）と、その後の遅い二次相から成ることが示されました。1〜2秒のインキュベーション時間後の60Co-B12の取り込みを測定する方法が、B12の初期取り込み速度に関する研究に使用されました。この初期過程は飽和動力学を示し、細胞あたりのVmaxは56分子/秒、K_mは5nmであり、細胞エネルギー代謝とは本質的に独立していました。シアン化物、フッ化物、亜ヒ酸、または2,4-ジニトロフェノールによる抑制は得られず、この初期の取り込み相に対する反応から、15〜35℃の温度変化に対する活性化エネルギーは3.8 kcal/moleと計算されました。HgCl2による抑制（0.1 mMで50%）は、1 mM N-エチルマレイミドや1 mM p-クロロ水銀ベンゾエートでは得られなかったことは、初期B12結合部位に比較的アクセスしづらいチオール残基の役割と一致していました。B12の二次相の取り込みは明らかに細胞のエネルギー代謝に依存しており、温度に対する反応から、約17 kcal/moleの活性化エネルギーが計算されました。シアン化物（10 mM）、亜ヒ酸（10 mM）、および2,4-ジニトロフェノール（0.1 mM）は、二次相の速度の少なくとも70%の抑制を示しました。5′-デオキシアデノシルコバラミンなどの他のコバラミンの形成は、B12輸送の必須部分ではありませんでした。細胞はまた、60Coラベルのコビナミドシアニウムを取り込むこともできました。