ラット多形核白血球由来のカルモジュリン非依存性一酸化窒素合成酵素

最近、ラット小脳から一酸化窒素合成酵素（EC 1.14.23）の精製が報告され、この酵素はカルモジュリンを必要とする酵素である（Bredt, D. S.、Snyder, S. H. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 87, 682-685）。本研究では、ラット多形核白血球の細胞質部分から近似的に均一な一酸化窒素合成酵素が精製された。精製手順には、アデノシン2',5'-ジリン酸-アガロースを用いた親和性クロマトグラフィーおよび陰イオン交換カラムDEAE-バイオゲルAを含む。ナトリウムドデシル硫酸のポリアクリルアミドゲル電気泳動では、酵素はMr = 150,000の単一の蛋白質バンドとして移動した。分子量は、スーペロース12 HR 10/30上でのゲル濾過で150,000と推定された。精製された酵素は不安定で、pH 7.4および4度Cでの半減期は3時間であった。酵素活性にはCa2+、NADPH、FAD、および(6R)-5,6,7,8-テトラヒドロ-L-ビオプテリンの存在が必要であった。カルモジュリン拮抗薬（W5、W7、W13およびトリフルオペラジン塩酸塩）は酵素活性を阻害せず、カルモジュリンの追加も酵素活性の増加には効果がなかった。白血球由来の酵素はカルモジュリン非依存性の一酸化窒素合成酵素のタイプであるようである。