フローサイトメトリーとフィコエリスリン‐タンデム染料コンジュゲートの安定性

ルーチンの臨床フローサイトメトリー手順は、スペクトル補償のために厳密でシンプルかつ再現可能な手順を要求します。現在の、しばしば手間のかかるスペクトル補償手順は、機器の設定、機器の性能、および試薬の変動性の結果です。特に、タンデム染料コンジュゲートの使用は、頻繁に適用する必要がある精巧なスペクトル補償手順を必要とします。製造業者、ロット番号、および取り扱い手順は、タンデム染料の蛍光特性に影響を与える重要な要素と見なされています。特定の条件がタンデム染料の放出スペクトルの変動性にどのように影響するかをより良く理解することで、測定の信頼性を大幅に向上させ、ルーチンの臨床フローサイトメトリーの設定手順を簡素化する可能性があります。私たちは、いくつかの一般的なフィコエリスリンタンデムフルオロクロームの蛍光特性に対する光暴露、取り扱い、および保管条件の影響を調査しました。一般的に、PE-Cy5は最も低い劣化率を示し、PE-Cy7は最も高い劣化率を示しました。保管中、長期的な劣化率は追加の光保護アプローチを使用して包装された試薬に対して最も低くなりました。この条件下で、PE-Cy7コンジュゲートの劣化率0.9%/月が0.3%/月に減少しました。劣化率が最小化されたため、私たちは数か月にわたって一連のタンデム染料コンジュゲートの緩慢な劣化が補償マトリックス値に及ぼす影響を調査しました。最後に、設定された領域とゲーティング戦略を持つ分析テンプレートのために、長期間にわたり同じ補償設定を使用する流れ細胞計測分析への緩慢な劣化の影響を探りました。