ラット肝細胞質からのグルココルチコイド受容体の精製。

ラット肝細胞質からの3H-トリアムシノロンアセトニド標識グルココルチコイド受容体は、ナトリウムドデシル硫酸塩ゲル電気泳動に従い、85%の均一性で精製された。それは、分子量89,000の1つのサブユニットで構成されており、1分子あたりのリガンド結合サイトを持つ。精製プロセスは、リン酸セルロース、DNA-セルロース（2回）、およびセファデックスG-200における逐次クロマトグラフィーを含んだ。DNA-セルロースでの2つのクロマトグラフィー工程の間に、受容体は熱活性化された。受容体は、第二のDNA-セルロースカラムからピリドキシアル5'-リン酸によって親和的に溶出された。最初の3つのクロマトグラフィー工程で達成された精製の均一性は、実験により60%から95%の間で変動した。第二のDNA-セルロースカラムでのクロマトグラフィー後、ステロイド・受容体複合体は、0.15 M KCl中でのストークス半径が6.0 nm、沈降係数が3.4 Sを示した。KClがない場合、沈降係数は3.6 Sであった。ヒドロキシアパタイトで濃縮した後、ステロイド・受容体複合体はポリアクリルアミドゲル中で等電点フォーカシングにより分析された。放射能は、pI 5.8の主要なタンパク質バンドと共にフォーカスすることが示された。トリプシンによる制限酵素分解後、放射能は、主要なタンパク質バンドと共に、未精製のステロイド・受容体複合体に以前説明されたpI 6.2でフォーカスした。