ニスタチン処理された気管細胞におけるNa-K-Cl共輸送：イソプロテレノール、上皮UTP、及びCliによる調節

哺乳類の気道上皮における塩素分泌は、アデノシン3',5'-環状モノリン酸（cAMP）依存的メカニズムを介してβ-アドレナリン作動薬によって刺激され、上皮三リン酸ヌクレオチド（ATP、UTP）によってcAMP非依存的メカニズムを介しても刺激されることが知られている。両方のタイプの分泌促進因子は、気道細胞の上皮Clチャネルを刺激することが知られている; しかし、刺激された分泌率を維持するためには、上皮Cl流出に並行してNa-K-Cl共輸送を介した基底側Cl流入がアップレギュレーションされなければならない。基底側共輸送活性の調節と上皮Cl流出との関係を調べるため、ニスタチンで処理した犬の気管上皮細胞の接触培養におけるCl輸送を調査した。ニスタチンをこれらの培養物の上皮膜に適用することで、上皮Cl透過性を増加させ、上皮膜を越えるCl輸送は主に共輸送体の活動を反映し、基底膜を越える輸送によって制限されるまでに達することができた。ニスタチンで処理されていない気管細胞の培養文化では、トランスエピテリアル（基底側から上皮）36Clフラックスは、イソプロテレノール（5μM、基底側）または上皮UTP（10μM）への曝露によって2倍から3倍に増加した。ニスタチンを上皮に適用（400 units/ml）すると、トランスエピテリアル36Clフラックスの基準レベルが約1.5倍に増加し、この流れのUTP刺激を排除したが、イソプロテレノールによる約2倍の刺激は持続した。ニスタチン治療も、これらの細胞における機能的Na-K-Cl共輸送体の測定である飽和可能な基底側3Hブメタニド結合のUTP刺激を排除した。イソプロテレノール刺激による結合は、ニスタチン治療によってわずかに抑制された。ニスタチンと低Cl（NO3の置換）を含む上皮培養媒体で培養をインキュベートすることにより、細胞内Cl濃度(Cli)を下げると、分泌促進因子や細胞収縮なしに基底側から上皮への36Clフラックスと3Hブメタニド結合の両方が増加した。この結果は、完全に3Hブメタニド結合に基づく以前の提案を支持する。M. Haas, D. G. McBrayer, J. R. Yankaskas. Am. J. Physiol. 264 (Cell. Physiol. 32): C189-C200, 1993、すなわち気道上皮細胞における基底側Na-K-Cl共輸送に対するUTP刺激は完全に二次的であり、上皮Cl流出の増加を必要とすること、さらにCliの減少がUTPに応答する共輸送活性化のシグナルとなる可能性があることを示唆する。また、イソプロテレノールによって開始されるcAMP依存のカスケードは、共輸送体を直接刺激するようである。