hnRNP LはHPV16のRNAポリアデニル化とスプライシングをAktキナーゼ依存的に制御する

Aktキナーゼの抑制はHPV16の遅延遺伝子発現を、HPV16の早期ポリアデニル化を減少させ、HPV16の遅延L1 mRNAスプライシングを活性化することによって引き起こす。私たちはHPV16の遅延mRNAにおける早期ポリAシグナルおよびスプライス部位でのRNA結合タンパク質の「ホットスポット」を特定した。hnRNP LがすべてのHPV16の遅延スプライス部位および早期ポリAシグナルの配列に関連していることを観察した。Aktキナーゼの抑制はhnRNP Lの脱リン酸化を引き起こし、HPV16 mRNAとのhnRNP Lの関連を減少させた。これに伴い、HPV16 mRNAへのU2AF65およびSam68の結合が増加した。さらに、hnRNP LまたはAktのsiRNAノックダウンがHPV16遺伝子発現を誘導した。Aktキナーゼ阻害剤でHPV16不死化角化細胞を処理すると、HPV16 mRNAへのhnRNP Lの結合が減少し、HPV16 L1 mRNAの産生が誘導された。最後に、HPV16亜ゲノム発現プラスミドにおけるhnRNP L結合部位の削除は、HPV16の遅延遺伝子発現の活性化をもたらした。結論として、AktキナーゼはRNA結合タンパク質hnRNP Lを制御することによって、HPV16の遅延遺伝子発現をRNA処理のレベルで抑制する。私たちは、Aktキナーゼの活性がHPV16の早期遺伝子発現を促進し、HPV16の遅延遺伝子発現を抑制する細胞内ミレウを支持していると推測する。