移動EM：相関光学顕微鏡と電子顕微鏡のための新しいツールとしての迅速移送システムと高圧冷凍の高スループット

本論文では、Leica EMPACT2高圧冷凍機に取り付けられた迅速移送システム（RTS）を、凍結固定分野における特別な応用のための新しいツールとして説明します。RTSは、サンプルを迅速に処理（<5秒）することを可能にする自動化されたシステムであり、高時間分解能相関光学顕微鏡と電子顕微鏡を組み合わせた高圧冷凍を初めて使用することを可能にします。さらに、30秒の作業サイクルにより、この迅速なターンオーバー時間は、他のサイクル時間が長いHPF機と比較して、バイオプシー材料のサンプルを劣化する前により多く取得することを可能にします。RTSを使用することで、6分間で4つの異なる組織の各3つのサンプルを取得することができました。サファイアディスク上で育成された細胞の90％のサンプルが良好に凍結されたという発見と相まって、RTSは迅速かつ信頼性が高いものでした。最も重要なのは、他の新たに開発されたアクセサリーとともに、RTSが光学顕微鏡によって観察される細胞内でライブに発生する特定のイベントを捉え、そのサンプル/イベントを4秒以内に凍結固定し、その後、優れた超微細構造の保存状態で電子顕微鏡で高解像度で分析することを可能にしたことです。これらの発展により、ライブ細胞イメージングによって観察できる細胞内プロセスを解明するためのツールが得られるはずです。しかし、それはルーチンなEM手法で捉えるには稀すぎるか、速すぎるか、あるいは構造の履歴がその性質を見分けるために必要な場合です。