効率化された変異検出システム：マルチカラーPCR後蛍光標識と毛細管電気泳動による単鎖構造多型解析

遺伝性疾患や癌の研究におけるヒトゲノム配列の知識の効果的な利用は、個々のサンプルにおける変異の検出に効率的な方法に大きく依存しています。本研究では、PCR産物を1つのチューブ内で2種類の蛍光染料で事後に標識し、単鎖構造多型（SSCP）条件を使用した自動毛細管電気泳動システムによって解析するシンプルで効率的な変異スキャンシステムを説明します。内部対照DNAを適切に使用することで、基準サンプルとサンプル間の電気泳動移動度の違いが正確に評価され、その後、変異の存在が統計的に判断されます。741 bpまでの3つの無関係な配列文脈の断片における34の既知の変異のうち33が、<0.3% の偽陽性信頼レベルで1つの電気泳動条件を使用して検出されました。すべての変異は、2つの温度での解析によって検出されました。このシステムは、人的介入が少なく、分析時間が短く、高感度で、データ解釈の客観性があるという利点があります。