二つの非トリガー二価リガンドによる同時クロスリンケージは、IgE Fc ε RI 複合体の相乗的シグナル伝達を引き起こす

我々は、IgE に結合する二価リガンドを二つ使用して、高親和性の IgE 受容体（Fc epsilon RI）の凝集とラット好酸球白血病（RBL-2H3）細胞の応答（受容体の不動化、Ca2+ 流入、脱顆粒）との関係を研究しました。これらの一つは対称的な二価リガンドである N,N'-bis[epsilon-[(2,4-dinitrophenyl)aminocaproyl]-L-tyrosyl]-L-cystine ((DCT)2-cys) で、mAb anti-DNP IgE の結合部位に特異的に結合し、細胞表面の IgE を効率的にクロスリンケージしますが、重要な脱顆粒や細胞内 Ca2+ の増加を引き起こしません。側方移動測定を含むいくつかの証拠は、このリガンドが二つの (DCT)2-cys と二つの IgE を含む安定な環状複合体を優先的に形成することを示しています。二つ目のリガンドは mAb anti-IgE の B1E3 で、重合体化した IgE-Fc epsilon RI に一致する側方移動の変化を引き起こし、また、細胞内 Ca2+ の増加や脱顆粒を引き起こしません。これら二つのリガンドは共に強力な応答を引き起こします。B1E3 の存在下で、(DCT)2-cys は広い濃度範囲において IgE-Fc epsilon RI の不動化を引き起こします；より狭い濃度範囲では、脱顆粒と Ca2+ の両方の変化を促進する強力な刺激因子です。我々は、細胞の活性化に対する投与量応答曲線を模擬 IgE 凝集曲線と比較しました。すなわち、(DCT)2-cys 濃度の関数として、平衡 IgE 凝集サイズ分布を予測する曲線です。我々の結果は、最大の細胞活性化が最大の IgE 凝集よりもはるかに高い (DCT)2-cys 濃度で発生することを示しています。IgE 凝集が最大であるとき、ほぼすべての凝集した IgE は環状二量体にあります。したがって、環状二量体は機能的には無効であるようです；B1E3 によってクロスリンケージされた後もそうです。細胞応答を刺激するために有効な凝集した IgE-Fc epsilon RI には、シグナルカスケードを開始するための重要な相互作用を可能にする特別な構造的または動的特性があるかもしれません。