Mcm4-Mcm6-Mcm7 DNAヘリカーゼ活性の生化学的分析

Mcmタンパク質は真核生物のDNA複製に重要な役割を果たしていますが、その生化学的機能は十分に理解されていません。最近、Mcm4-Mcm6-Mcm7 (Mcm4,6,7)複合体にDNAヘリカーゼ活性が関連していることを報告しました。これは、この複合体がDNA複製の開始においてDNAを解開する酵素として関与していることを示唆しています。この研究では、昆虫細胞からマウスのMcm2、4、6、7タンパク質を発現させて分離し、Mcm4およびMcm6タンパク質の保存されたATPアーゼモチーフが変異したさまざまな変異体Mcm4,6,7複合体を特徴付けました。そのような調製物に関連する活性は、DNAヘリカーゼ活性が本質的にMcm4,6,7複合体に関連していることを示しました。これらの変異体Mcm4,6,7複合体の生化学的分析は、複合体内のMcm6タンパク質のATP結合活性がDNAヘリカーゼ活性にとって重要であり、Mcm4タンパク質が複合体の一本鎖DNA結合活性に役割を果たしている可能性があることを示しました。また、DNAヘリカーゼと一本鎖DNA結合の2つの活性は分離可能であることも示されました。