DNA損傷はp53のアミノ末端のリン酸化を誘導する

データは、DNA損傷がp53タンパク質の特定の翻訳後修飾を引き起こすことを示しています。in vivo放射線標識p53トリプシンリン酸ペプチドの二次元ペプチッドマッピング、組換えトランクテッドp53タンパク質、合成p53トリプシンペプチドを用いて、ML-1細胞をIonizing放射線に曝露させた後に特異なp53リン酸化ペプチドを特定しました。このペプチドはp53の最初の24個のアミノ酸を表し、3つのリン酸化されたセリン残基を含んでいます。特定のp53リン酸化ペプチド抗体は、DNA損傷がIonizing放射線（IR）または紫外線（UV）放射線によって誘発された後にリン酸化されるp53の2つのセリンの1つとしてセリン-15を特定しました。IRによって誘導されたp53のリン酸化は、電気泳動移動度シフトアッセイによって評価したp53のDNAへの結合や解離の動力学に影響を与えません。ただし、DNA損傷によって誘導されたp53のリン酸化は、下流のp53ターゲット遺伝子の転写の増加と相関しています。AT細胞ではIR後6時間以内に低レベルのリン酸セリン-15のp53が検出可能ですが、正常な個体からのリンパ芽球は1時間以内にこの修飾を示します。対照的に、セリン-15のp53のリン酸化は、UV放射線後の正常細胞とAT細胞で類似しています。我々の結果は、p53がDNA損傷に応答してリン酸化され、この新たなリン酸化がp53のその後の誘導および活性化に関与している可能性があり、ATMがIR後のp53リン酸化の動力学に影響を与えますが、セリン-15のリン酸化には絶対に必要ではないことを示しています。