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先行研究により、ヒト血液中の樹状細胞のサブセット及びそれらのT細胞介在性免疫応答に対する刺激機能が特定されています。しかし、樹状細胞は血液単核細胞のわずか0.1-1%を占めるため、分離の困難さから研究は限られてきました。我々は、信頼性の高い80-90%の純度を持つ調製物を得るためのプロトコルを提示します。この方法は、血液中の主要細胞型の連続的な枯渇に依存し、同時に樹状細胞との比較のためにT細胞、単球、B細胞およびナチュラルキラー細胞を提供します。手順の最後のステップは、CD45Rエピトープの発現に基づいて残存汚染物質を除去することです。樹状細胞の濃縮は、これら抗原提示細胞の表面に関連した三つの基準によって明らかです。(i) すべての樹状細胞は可動性があり、大きなラメルリポディアやベールを常に形成しています。(ii) 大規模なモノクローナル抗体パネルとFACSを用いて分析した場合、細胞はすべての既知の多型主要組織適合性遺伝子産物の高レベルを発現し、明確な受容体及び接着分子の組み合わせを示します。例えば、単球とは異なり、樹状細胞はFc受容体とコロニー刺激因子1受容体(c-fms)を欠きますが、ICAM-1およびLFA-3接着因子のはるかに高いレベルを発現します。(iii) 機能アッセイにおいて、樹状細胞は単球やリンパ球に比べて初発混合白血球反応を刺激する力が少なくとも100倍高いです。これらの特性は、樹状細胞の痕跡サブセットをさらなる機能的および臨床的研究により適応可能にするのに役立ちます。
Freudenthal et al. (1990) はこの問題を研究しました。
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