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HIS4遺伝子の転写は、翻訳を開始するATGから-60の位置にある単一のサイト(I)で始まります。転写開始の特異性に必要な要素を特定するために、5'非翻訳領域にリンカー挿入/欠失を行いました。TATAで始まり、転写の開始点に近い4つの配列(-170、-132、-123、-102)があるにもかかわらず、-123にある配列(TATA-123)だけが転写開始に必要です。TATA-123が削除された突然変異体に合成オリゴヌクレオチドを挿入したところ、TATAまたはTATAAだけでは機能せず、TATAAAは野生型配列とほぼ同等に機能することがわかりました。このヘキサマーは逆向き(TTTATA)では機能しません。合成TATA配列を通常のサイトの上流に配置すると、TATA-123が存在する場合でも、開始ポイントは大まかに同じ比率で上流に移動します。TATA配列と野生型の転写開始点(Iサイト)との間の距離が変更された株での転写物の分析は、酵母においては高等細胞とは異なり、転写はTATA配列から厳密に定義された距離で開始されないことを示しています。TATAとIサイトとの距離を変更した構築物やIサイトを削除した構築物は、HIS4の発現レベルに影響を与えることなく、転写開始のパターンを変更します。Iサイトを排除する欠失は異種の転写物を生成し、TATA-123とIサイトとの間の距離を大幅に短縮する欠失は、Iサイトの下流で複数のサイトで開始されます。したがって、TATAとそれに続く配列の両方が転写開始のパターンを決定します。
Nagawa et al. (Sun,) はこの問題を研究しました。
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