in vitro RNA進化反応から出現した複製種

自己持続型配列複製技術は、in vitroでDNAおよびRNA分子の等温増幅を可能にします。この方法は、特定の核酸配列を増幅するために、逆転写酵素とDNA依存性RNAポリメラーゼの活性に依存しています。私たちは、このプロトコルを修正して、特定の化学反応を触媒するRNAの選択的増幅を可能にしました。この修正されたシステムを使用したin vitro RNA進化実験中に、「自己中心的」RNAの独特なクラスが出現し、意図されたRNAを排除して複製しました。この自己中心的な分子のクラス、RNA Zと呼ばれるメンバーは、目標化学反応を触媒できないにもかかわらず、効率的に増幅します。彼らの増幅には、逆転写酵素とRNAポリメラーゼの両方の作用が必要で、DNAおよびRNA複製中間体の合成を含みます。RNA Zの提案された増幅メカニズムは、RNAポリメラーゼによる転写のテンプレートとして機能するDNAヘアピンの形成を含みます。この配置はDNAの2本鎖をリンクさせ、RNAポリメラーゼプロモーター配列が埋め込まれたRNA転写物の生成を結果としてもたらします。