カルシウムイオノフォアは培養細胞によるアミロイドβペプチドの産生を増加させる

アミロイドβペプチド（Aβ）は、さまざまな細胞が培養されているときの通常の代謝中にメディアに放出される。家族性アルツハイマー病におけるβアミロイド前駆体タンパク質（βAPP）のAβ領域内または周辺のいくつかのミスセンス変異の発見は、この障害の病因におけるβAPPの異常な処理の役割について強力な証拠を提供する。Aβドメイン内でβAPPが切断される原因となる分泌経路の相対的な利用を調節する細胞メカニズムと、完全なAβを生成する代替的なプロテオリティック経路は不明である。アルツハイマー病を含むいくつかの神経変性疾患は異常なカルシウム代謝を特徴とすると仮定されている。我々は、βAPP cDNAで形質転換したヒト腎293細胞におけるAβ産生に対する秩序のないカルシウム恒常性の影響を調査した。細胞の条件付きメディアから免疫沈降されたAβは、代謝ラベリングおよびパルス-チェイスラベリングの両方のパラダイムで免疫沈降された完全長および分泌型βAPPと比較された。カルシウムイオノフォアA23187は、一貫してAβの産生を約3倍増加させた。この効果は、完全な細胞内の extracellular calcium の存在に依存していた。カフェインも、細胞内貯蔵からのカルシウムの放出を通じてAβの産生を増加させた可能性がある。Aβの増加はcAMP依存性ではなく、フォルボールエステルによる処理はAβレベルを低下させたため、プロテインキナーゼC依存経路によって媒体されなかった。イオノフォアのβAPP成熟およびリン酸化に対する影響も確立された。我々は、細胞内カルシウムレベルの上昇がβAPPの成熟およびプロテオリティック処理に重要な影響を与え、アミロイド原性Aβペプチドの産生と放出を大幅に増加させることを結論づけた。