Pex5p、ペルオキシソームサイクリングレセプターは単量体非球状タンパク質である

哺乳類において、新しく合成されたペルオキシソームマトリックスタンパク質をオルガネラにターゲットするには、ペルオキシソームサイクリングレセプターであるPex5pが必要です。Pex5pは、複雑な一時的なタンパク質間相互作用ネットワークに関与する多ドメインタンパク質です。Pex5pは、オルガネラへの経路のほとんどのペルオキシソームタンパク質と直接相互作用するだけでなく、ペルオキシソームのドッキング/移動機構のいくつかの成分に対する結合ドメインも持っています。しかし、Pex5pへの貨物タンパク質の結合がその特性にどのように影響するかについての知識はまだかなり限られています。ここでは、ヒトPex5pに関与するタンパク質間相互作用の同定と特徴付けに特に有用なプロテアーゼアッセイについて説明します。PTS1を含むペプチド/タンパク質のPex5pへの結合や、このペロキシンとPex13pのSrcホモロジー領域3との相互作用は、このアッセイを使用することで容易に示されることができました。これらのPex5p相互作用ペプチド/タンパク質がPex5pの想定される四次構造に及ぼす可能性のある影響を考慮するために、サイズ排除クロマトグラフィー、スクロース勾配遠心分離、沈降平衡遠心分離を用いてヒトPex5pの流体力学的特性を分析しました。私たちの結果は、Pex5pが異常な形状の単量体タンパク質であることを示しています。これらの発見がペルオキシソーム膜を横断するタンパク質移動の現在のモデルに与える影響について議論します。