サルコプラズミック網状体のCa(2+)-ATPaseにおいて、ホスホランバンとの機能的結合に影響を与える領域の特定

心筋および遅筋サルコプラズミック網状体のCa(2+)-ATPaseのSERCA 2アイソフォームがCOS-1細胞でホスホランバンと共発現されると、Ca2+親和性（Ca2+輸送のCa2+依存性として測定された）が0.2-0.3 pCaユニット減少することが観察された。この抑制効果はcAMP依存性プロテインキナーゼAによるホスホランバンのリン酸化によって逆転した。SERCA 1およびSERCA 3もCOS-1細胞でホスホランバンと単独でまたは共に発現された。SERCA 1は高いCa2+親和性を有し、ホスホランバンとの共発現により減少したが、SERCA 3は低いCa2+親和性を有し、ホスホランバンとの共発現によって変化しなかった。Ca2+ ATPaseの配列内でホスホランバンとの機能的相互作用を決定する領域を特定するために、SERCA 2とSERCA 3の間のキメラCa(2+)-ATPaseが構築され、ホスホランバンと共発現された。一連のキメラのCa2+親和性を測定した結果、SERCA 2の細胞質ドメインの2つの異なる領域がホスホランバンとCa(2+)-ATPaseの間の機能的相互作用の実現に必要であることが示された。最初の領域はリン酸化ドメイン内のアミノ酸336と412の間に位置し、以前に特定されたホスホランバンの相互作用部位に対応している（James, P., Inui, M., Tada, M., Chiesi, M., and Carafoli, E. (1989) Nature 342, 90-92）。2番目の領域はヌクレオチド結合/ヒンジドメイン（アミノ酸467-762）であり、SERCA型ポンプの高いCa2+親和性を決定する（Toyofuku, T., Kurzydlowski, K., Lytton, J., and MacLennan, D. H. (1992) J. Biol. Chem. 267, 14490-14496)。