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免疫組織化学(IHC)は、冷 ischemia time、固定剤、固定時間、パラフィン、保存時間、抗体、抗原回収技術、検出システムなどのいくつかの要因に影響されます。死後組織の設定では、死後遅延だけでなく、苦痛状態も関心の対象です。ここでは、追加の変数、すなわち切片の厚さを評価し、この変数もIHCの結果に影響を与えることを確認しました。これは、ラベリングの程度が評価されるパラメータであるときに重要です、例えば、病気のステージやグレードを割り当てるときなど。さらに、神経細胞を含む脳組織を評価する際には、4〜100 µmの範囲の細胞体や、4または7 µmの切片に異なるタンパク質から構成されるさまざまな細胞区画が局在します。したがって、7 µmの厚さの切片で見られるものは、4 µmの厚さの切片には欠けている可能性があります。商業用抗体の分子サイズに関する情報が不足していることも問題であり、このパラメータが三次元切片における分子の分布に影響を与える可能性があります。使用する抗体の選択と染色方法論は、IHC結果にとって重要であることが認識されていますが、切片の厚さや分子量については十分に議論されていません。IHCは組織の評価に使用される予測不可能な技術であることが示されています。これは、出版物における詳細な方法論の説明の必要性、及びこの方法論に関連するすべての潜在的な落とし穴を認識し、調和させる必要性を強調しています。
Libard et al.(2018)はこの問題を研究しました。