BRCA2 C-말단 클램프가 RAD51 다이머를 재구성하여 복제 포크 안정성을 위해 B-DNA에 결합합니다.

요약 종양 억제 단백질 BRCA2는 복제 포크 보호(FP) 및 동종 방향 DNA 파손 복구(HDR)에서 RAD51과 함께 작용합니다. 암의 원인 및 치료 저항성에 필수적인 BRCA2 C-말단은 단일 가닥(ss)DNA에 RAD51 필라멘트가 조립된 후 안정화된다고 생각되었습니다. 여기서는 DNA 결합 전에 ATP 결합 RAD51과의 BRCA2 C-말단 상호 작용 도메인(TR2i)의 상세한 결정 구조를 규명했습니다. 재조합 RAD51 필라멘트는 확장된 ATP 결합 RAD51 다이머를 포함하는 반면, TR2i는 예상치 못하게 ATP-RAD51을 HDR 개시와 맞지 않는 이중 가닥 B-DNA 결합을 수용하는 독특한 다이머 형태로 재편성합니다. 구조적, 생화학적, 분자적 결과 및 인터페이스 유도 변이들은 TR2i의 FP 메커니즘을 밝혀냅니다. 프로린 주도의 이차 구조가 잔기 삼중체를 안정화하고 RAD51 다이머에 걸쳐 RAD51 M210과 BRCA2 S3291/P3292의 중대한 상호작용을 참여하게 합니다. 이는 S기 동안 FP와 G2 기간 동안 HDR 사이에서 전환되는 사이클린 의존 키나제(CDK) 인산화 사이트입니다. TR2i는 명백히 RAD51이 ssDNA에서 이중 가닥 및 B-DNA 결합으로 전환되도록 하는 알로스테릭 클램프로 작용하여 HDR보다 FP를 강화합니다.