위암의 암 관련 섬유아세포가 RCN3 경로를 통해 대식세포 극성을 조절한다.

목적: 위암(GC)의 종양 미세환경에서 암 관련 섬유아세포(CAFs)의 역할과 분자적 메커니즘을 탐구하기 위함이다. 방법: 먼저 GC 환자에서 CAF의 발현을 평가하여 풍부도를 확인하고 생존 분석을 수행하였다. 이후 TCGA 데이터를 사용하여 차등 분석, 생존 분석 및 EPIC 분석을 수행하였으며, CAF의 차등 분석을 위해 단일세포 데이터(GSE183904)를 다운로드하였다. 임상 GC 조직 샘플에 대해 임상 데이터 풀링, 단변량 및 다변량 콕스 분석, 면역형광을 수행하여 환자의 CAF 내 RCN3 발현을 탐구하였다. RCN3의 발현을 확인하기 위해 웨스턴 블롯과 정량적 중합효소 연쇄반응(qPCR)을 사용하였다. RCN3, PCSK6 및 STAT1 간의 관계는 크로마틴 면역 침전(CHIP) 실험을 통해 탐구하였고, 대식세포 극성에 대한 유전자의 영향을 생물학적 M1/M2 바이오마커를 탐지하여 확인하였다. 결과: GC에서 CAF가 정상 집단에 비해 유의미하게 높은 것으로 나타났다. TCGA 차등 분석 결과를 보여주면서 GC에서는 RCN3의 발현 수준이 상당히 상향 조절된 것을 관찰하였다. 임상 통계는 RCN3 발현 수준의 상승과 종양 크기의 T-stage 분류 간에 양의 상관관계를 나타낸다. 또한, RCN3은 위암 환자의 전체 생존에 유의미한 영향을 미치는 독립적인 예후 지표로 나타났다. 단일세포 데이터 분석 결과 대식세포에서 PCSK6의 높은 발현이 확인되었고, GC 환자의 샘플에 대한 면역형광 염색 결과 GC 조직의 대식세포 세포막에서 PCSK6의 발현이 증가한 것을 보여주었다. 이후 세포 실험을 통해 RCN3 단백질이 PCSK6의 발현을 조절하고, PCSK6가 STAT1을 통해 대식세포 극성을 조절할 수 있음을 확인하였다. 결론: CAF는 GC에서 RCN3/PCSK6/STAT1 경로를 통해 대식세포 극성을 조절한다.