점 돌연변이가 PR65의 구동성 적응성에 미치는 영향: 분자 시뮬레이션과 나노개구 광학 집게의 통찰

PR65는 헤테로트리머 단백질 인산화효소 2A (PP2A)의 HEAT 반복 지지대 서브유닛이자 전형적인 단일 반복 단백질입니다. 그 구동 기계학은 기질 결합/촉매 인터페이스를 열고 닫음으로써 PP2A 기능에서 중요한 역할을 합니다. 컴퓨터 시뮬레이션을 통한 포화 돌연변이 발생을 사용하여, 우리는 PR65의 “힌지” 잔기를 식별하였고, 그 치환이 구동성 적응성 및 PP2A 기능을 변화시킬 수 있음을 발견했으며, 발현되고 용해되는 것으로 확인된 여섯 가지 돌연변이를 선택했습니다. 분자 시뮬레이션과 나노개구 광학 집게는 돌연변이가 PR65의 구조 및 역학에 미치는 특정 효과에 대한 일관된 결과를 나타냈습니다. 시뮬레이션에서 관찰된 두 개의 변이는 확장된/열린 구성을 안정화시키며 실험에서 더 높은 코너 주파수와 낮은 이동 산란을 보였고, 이는 확장된 구성으로의 변화를 나타내었습니다. 반면, 또 다른 변이는 반대의 특성을 보였으며, 이는 시뮬레이션과 실험 모두에서 확인되었습니다. 이 연구는 돌연변이가 단백질 구조와 역학에 미치는 영향을 탐구하기 위해 시뮬레이션 접근 방식과 통합된 단일 분자 나노개구 기반 집게의 힘을 강조합니다.