ATP는 온전한 세포에서 수용체 매개 내포에 필요합니다.

우리는 트랜스페린의 수용체 매개 내포에서 세포 ATP의 필요성을 입증했습니다. 이는 막 투과성이 없는 환원제인 글루타티온(GSH)에 대한 저항성을 기반으로 한 새로운 내포 검사법을 사용하여 달성되었습니다. 디페리크-트랜스페린은 절단 가능한 이황화 결합을 통해 비오틴에 결합되었고 요오드화되었습니다. 125I-비오틴-S-S-트랜스페린(125I-BSST)의 내부화는 세포를 GSH로 처리한 후 아비딘-세파로스에의 흡착을 통해 정량화되었습니다. ATP 결핍 세포에서 125I-BSST의 수용체 매개 내포는 심각하게 억제되었습니다. 세포를 N2 대기에서 배양하거나 NaN3와 NaF의 존재 하에 ATP를 고갈시켰을 때도 유사한 결과가 얻어졌습니다. 후자의 처리만으로도 표면 트랜스페린 수용체의 손실이 발생하였으며, 이는 세포 ATP의 감소와 상관관계가 없었습니다. GSH 저항성의 획득과 대조적으로, 125I-BSST의 명백한 내부화는 항트랜스페린 항체에 대한 접근 불가로 평가될 때 ATP 결핍 세포에서 대조 수준에 도달했습니다. 우리의 생화학적 및 형태학적 데이터는 ATP가 수용체 매개 내포에 필요하지만, ATP 결핍 세포에서는 리간드가 항체와 같은 큰 탐침에 접근할 수 없는 깊게 움푹 패인 구멍으로 효율적으로 격리될 수 있음을 시사했습니다. 그러나 GSH와 같은 작은 분자에는 접근할 수 있습니다.