SHP-1과 SHP-2는 1차 인간 T 세포 자극 시 프로그램된 세포 사멸 1의 면역 수용체 티로신 기반 전환 모티프와 연관되지만, 오직 수용체 결합만이 T 세포 활성화를 방지한다.

1차 인간 CD4 T 세포에서 프로그램된 세포 사멸 1(PD-1) 신호 전달을 매개하는 시스 및 트랜스 작용 인자를 연구하기 위해, 우리는 생쥐 CD28 외부 도메인과 인간 PD-1 세포질 꼬리로 구성된 키메라 분자를 만들었다. 이 구조는 CD4 T 세포에 도입되었을 때 T 세포 확장 및 사이토카인 생성을 억제하는 내인성 PD-1의 활동을 모방한다. PD-1의 세포질 꼬리는 ITIM과 면역 수용체 티로신 기반 전환 모티프(ITSM)라는 두 개의 구조적 모티프를 포함한다. ITIM의 돌연변이는 PD-1 신호 전달이나 기능적 활동에 미치는 영향이 거의 없었다. 대조적으로, ITSM의 돌연변이는 PD-1이 사이토카인 합성을 차단하고 T 세포 확장을 제한하는 능력을 무효화했다. 추가 생화학적 분석 결과, PD-1이 T 세포 활성화를 차단하는 능력은 ITSM 도메인에 SHP-1과 SHP-2를Recruit하는 것과 연관되었고, 어댑터 Src 동종 영역 2 도메인을 포함하는 분자 1A는 포함되지 않았다. TCR 자극 T 세포에서 SHP-2는 PD-1과 연관되었고, PD-1의 결합이 없어도 마찬가지였다. 이러한 상호작용에도 불구하고, PD-1이 T 세포 활성화를 차단하는 능력은 수용체 결합을 필요로 하였으며, 이는 PD-1과 CD3 및/또는 CD28의 공동 위치가 T 세포 활성화를 억제하는 데 필요할 수 있음을 시사한다.