아라비노스 PBAD 프로모터를 포함한 벡터에 의한 엄격한 조절, 변조 및 높은 수준의 발현

우리는 araBAD (아라비노스) 오페론의 PBAD 프로모터와 이 프로모터의 양성자 및 음성자 조절 단백질인 araC를 암호화하는 유전자를 포함하는 일련의 플라스미드 벡터(pBAD 벡터)를 구축했습니다. 이러한 벡터에서 발현을 모니터링하기 위해 phoA 유전자와 phoA 융합체를 사용하여 유도/억제 비율이 PTAC 기반 벡터의 경우 50배에 비해 1,200배가 될 수 있음을 보여줍니다. phoA 발현은 유도제(아라비노스) 농도의 넓은 범위에서 조절될 수 있으며, 발현을 억제하는 포도당의 존재로 인해 매우 낮은 수준으로 감소될 수 있습니다. 또한, 유도 및 억제의 동역학은 매우 빠르며 숙주 균주의 ara 대립유전자에 의해 상당한 영향을 받습니다. 따라서 효율적으로 빠르게 켜고 끌 수 있는 이 시스템의 사용은 온도 변화 없이 매우 간단하게 박테리아 생리학의 중요한 측면을 연구할 수 있게 합니다. 우리는 PBAD 프로모터의 엄격한 조절을 이용하여 필수 유전자의 널 변이의 표현형을 연구하고 pBAD 벡터의 발현 시스템으로서의 사용을 탐색했습니다.