적절한 생합성, 분비 및 생물학적 기능을 위해 에리트로포이에틴의 특정 위치에서의 당화가 필수적입니다.

에리트로포이에틴(Ep)이라는 당단백질 호르몬은 적혈구 생성을 주요하게 조절하며, 신장에서 합성되고 N-결합 사슬 3개와 O-결합 사슬 1개로 성숙한 단백질로 분비됩니다. Ep의 생합성 및 기능에서 각 탄수화물 부분의 역할을 조사하기 위해, 우리는 인간 Ep의 cDNA에서 오리곤클레오타이드 지향 변이 유발을 사용하여 각 탄수화물 부착 사이트의 아미노산을 변경했습니다. 각 변형된 cDNA 구조는 안정적으로 형질감염된 신장 세포주의 배아 햄스터 신장 세포에서 발현되었습니다. 우리는 아스파라긴 38 또는 83에서 N-결합 탄수화물의 부착을 방지하거나 세린 126에서 O-결합 당화 방지를 통해 각 특정 위치의 당화가 Ep의 적절한 생합성 및 분비에 중요함을 보여주었습니다. 세포 추출물의 분획은 이 세 위치(38, 83 및 126)에서 당화가 결여된 변종 단백질이 주로 막 성분과 연관되거나 빠르게 분해됨을 나타냈습니다. 이 세 변종 단백질 중 10% 미만이 제대로 처리되어 세포에서 분비되었습니다. 아스파라긴 24에서 N-결합 당화가 결여된 Ep 단백질은 본래의 Ep만큼 효과적으로 합성되고 분비됩니다. 24 및 38 위치의 탄수화물은 Ep의 생물학적 활성에 관여할 수 있으며, 이 위치에서의 올리고당 측쇄 중 하나의 결여는 호르몬의 생물학적 활성을 감소시켰습니다.