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군집화되고 정기적으로 간섭받는 짧은 팔린드롬 반복(CRISPR)/CRISPR 관련(Cas) 시스템은 박테리아와 고세균에서 바이러스와 플라스미드에 대한 적응 면역을 제공합니다. 침입하는 핵산의 침묵은 외부 핵산의 표적화 및 분해를 위한 안내체 역할을 하는 작은 간섭 CRISPR RNA(crRNA)로 미리 로딩된 리보핵단백질 복합체에 의해 수행됩니다. 여기서 우리는 Streptococcus thermophilus CRISPR3/Cas 시스템의 Cas9-crRNA 복합체가 crRNA와 상보적인 서열을 포함하는 DNA의 특정 위치에서 인 비트로에서 이중 가닥 파단을 생성한다는 것을 보여줍니다. DNA 절단은 두 개의 독립적인 활성 부위인 RuvC와 HNH를 사용하는 Cas9에 의해 수행되어 서로 반대인 DNA 가닥에서 위치 특정 스니크를 생성합니다. 결과는 Cas9-crRNA 복합체가 RNA 안내 엔도뉴클레아제로 작동하며 RNA 방향의 표적 서열 인식 및 단백질 매개 DNA 절단 기능을 갖는다는 것을 보여줍니다. 이러한 발견은 보편적이며 프로그래밍 가능한 RNA 지향 DNA 엔도뉴클레아제를 설계하는 길을 엽니다.
Gasiūnas 외 (화요일,)은 이 질문을 연구했습니다.