생체 내 DNA 합성을 빠르고 민감하게 탐지하기 위한 화학적 방법

우리는 5-에티닐-2'-데옥시유리딘(EdU)의 도입과 Cu(I) 촉매를 통한 3 + 2 사이클로부가 반응("클릭" 화학)을 통해 번식하는 세포에서 DNA 합성을 탐지하는 방법을 개발하였습니다. EdU 라벨의 탐지는 매우 민감하며 몇 분 안에 수행할 수 있습니다. 탐지에 사용되는 형광 아지드의 작은 크기는 샘플 침투성을 높여 대형 조직 및 장기 이식체의 전체 장착 준비물 염색을 가능하게 합니다. BrdU와는 달리, 이 방법은 샘플 고정이나 DNA 변성을 요구하지 않으며 좋은 구조 보존을 허용합니다. 우리는 이 방법을 배양된 세포 및 전체 동물의 장과 뇌에서 사용한 사례를 보여줍니다.