인간 중간엽 줄기세포의 신속하고 효율적인 배양 방법

지난 10년 동안, 뼈 조직 공학에서 인간 중간엽 줄기세포(hMSCs)의 사용에 대한 많은 관심이 있었습니다. hMSCs는 비교적 쉽게 얻을 수 있고 배양에서 빠르게 확장될 수 있지만, 임상 목적으로는 대량이 필요하며 비용을 최소한으로 유지해야 합니다. 따라서 신속하고 효율적인 배양 프로토콜이 유익할 것입니다. 본 연구에서는 19명의 기증자로부터 분리한 뼈 마리오 유래 hMSCs의 확장 및 골 형성 분화에 대한 다양한 배지 조성의 영향을 조사하였습니다. 또한 낮은 시딩 밀도와 덱사메타손이 hMSCs의 확장과 이들의 인 비트로 및 인 비보 골 형성 분화 능력에 미치는 영향을 조사했습니다. 100 cells/cm2 밀도에서 시딩된 hMSCs는 5000 cell/cm2에서보다 유의미하게 높은 성장률을 보였으며, 이는 덱사메타손의 추가에 의해 더욱 향상되었습니다. 확장된 hMSCs는 CD29, CD44, CD105, CD166에 대한 양성 염색을 기준으로 인 비트로에서 특성화되었습니다. 확장된 hMSCs의 인 비트로 골 형성 잠재력은 알칼리 포스파타제에 대한 유세포 분석 염색으로 평가되었습니다. hMSCs의 인 비보 뼈 형성 잠재력은 세포를 세라믹 스캐폴드에 시딩한 후, 면역 결핍 생쥐에 피하 이식하고 6주 이식 후 새로운 뼈 형성의 조직병리학적 평가를 통해 평가되었습니다. 모든 기증자로부터 확장된 hMSCs는 배양 조건에 관계없이 유사한 골 형성 잠재력을 나타냈습니다. 이러한 결과를 바탕으로, 우리는 덱사메타손이 포함된 알파-미니멀 필수 배지에서 100 cells/cm2로 세포를 시딩함으로써 hMSCs를 배양하는 효율적인 방법을 개발하였습니다.