포유류 염색체를 위한 콜히친, 저삼투 시트르산, 스쿼시 시퀀스

이 방법은 쥐의 골수에 대해 개발되었지만, 다른 조직 및 다른 종의 소형 포유류에도 적용될 수 있습니다. 쥐는 0.5 ml의 0.025% 콜히친 용액을 복강 내 주사받고 1시간 후에 도살됩니다. 대퇴골은 신속하게 절개되고, 관절면은 제거되며, 골수는 피하 주사기로부터 따뜻한 저삼투성 나트륨 시트르산 용액으로 골대의 내부에서 세척됩니다. 골수를 주사기로 흡입하고 배출하는 부드러운 과정이 이를 미세한 서스펜션으로 변환합니다. 서스펜션은 37°C에서 10분 동안 시트르산 용액에 보관됩니다. 세포는 배양 튜브에서 나일론 체를 통해 원심분리하여 결합 조직과 뼈 스피큘을 제거한 후, 초산-알코올 (1:3)로 고정하고 표준 Feulgen 절차에 따라 염색됩니다. 세포는 각 시약의 변경 시 원심분리를 통해 농축됩니다. 콜히친 전처리와 세포 서스펜션 작업의 장점이 강조됩니다.