매직 앵글 스피닝 동적 핵 편극(NMR)을 이용한 세포 내 약물 정량

세포 내 약물 농도의 결정은 약물의 기능과 효능에 대한 더 나은 이해를 제공할 수 있습니다. 이상적으로는, 이는 약물이나 목표물질에 대한 어떠한 수정 없이 비파괴적으로 수행되어야 하며, 관심 있는 분자의 낮은 양도 탐지할 수 있는 능력을 가져야 하고, 대부분의 경우 μM에서 nM 범위(백만 세포당 pmol에서 fmol)여야 합니다. 불행히도, 현재 이러한 요구 사항을 동시에 충족하는 세포 내 약물 농도의 직접적인 정량적 측정을 제공하는 실험 기법이 도전적입니다. 여기에서 우리는 매직 앵글 스피닝 동적 핵 편극(MAS DNP)이 이러한 요구 사항을 충족하는 데 사용될 수 있음을 보여줍니다. 우리는 Wingless와 Int-1 신호 경로의 활성제인 약물 15NCHIR-98014의 세포 내 양을 정량하기 위해 15N 라벨링과 결합된 정량적 15N MAS DNP 접근 방식을 적용하여 백만 세포당 수십에서 수백 피코몰의 세포 내 약물 양을 결정합니다. 이는 우리가 아는 한, MAS DNP가 세포 내 약물 양을 성공적으로 추정하는 데 사용된 첫 번째 사례입니다.