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마이크로신 J25 (MccJ25)는 비정상적인 스레드 라소 구조를 가진 리보솜 합성 항균 펩타이드로, 펩타이드의 C-말단 "꼬리"가 N-말단 잔기로 형성된 거대 고리 "링"을 통과합니다. MccJ25의 대장균에서의 생산은 구조유전자 mcjA, 두 개의 성숙 효소 mcjB 및 mcjC, 그리고 MccJ25 수출 펌프 형태의 면역 인자 mcjD를 인코딩하는 네 개의 유전자 클러스터에 의존합니다. 여기서 우리는 mcjA 및 mcjD의 발현을 수직적으로 조절하는 시스템을 개발하여, 대장균에서 MccJ25의 생산 및 수출/면역을 독립적으로 조절할 수 있도록 했습니다. 우리는 이 시스템을 사용하여 MccJ25의 링 또는 꼬리 부분을 목표로 하는 포화 돌연변이 유전자 라이브러리를 스크리닝하였고, 항균 기능을 유지하는 거의 100개의 새로운 MccJ25 변종을 발견했습니다. 펩타이드의 꼬리 부분에서의 다중 아미노산 치환은 잘 허용되지만, 펩타이드의 링 부분의 돌연변이는 MccJ25의 항균 기능에 해가 됩니다. 우리는 링 변종의 기능 감소가 이러한 변종이 민감한 균주의 세포질로 수송될 수 없는 데 기인한다는 것을 입증했습니다. 추가로, 우리는 꼬리 라이브러리에서 MccJ25-민감 균주인 대장균 및 살모넬라 엔테리카 세르오바 뉴포트에 대해 개선된 효능을 가진 여러 MccJ25 변종을 발견하였으며, 최상의 변종은 효능이 거의 5배 증가하는 결과를 보였습니다. 여기서 설명한 결과는 다양한 아미노산 서열이 단단한 라소 펩타이드 접힘에 의해 허용될 수 있다는 증거를 제공합니다.
Pan et al. (Thu,)은 이 질문을 연구했습니다.
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