인간 유두종 바이러스 E6/E7 유전자에 의해 전이된 기능적으로 구별되는 인간 골수 스트로말 세포주

인간 유두종 바이러스 E6/E7 유전자를 포함하는 복제 결함 재조합 레트로바이러스(LXSN-16 E6E7)를 사용하여 인간 골수의 스트로말 세포를 불로소득화하였다. E6/E7 유전자 산물은 각각 종양 억제 단백질 p53과 Rb의 기능에 방해를 주어, 유의미한 변형 없이 세포 주기 정지를 방지한다. HS-1에서 HS-27까지 지정된 27개의 불로소득화된 클론이 분리되었으며, 그 중 4개는 이 보고서에서 특징지어졌다. HS-5와 HS-21 두 개의 세포주가 섬유모세포같이 보이며, granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), granulocyte-macrophage-CSF (GM-CSF), macrophage-CSF (M-CSF), Kit 리간드 (KL), macrophage-inhibitory protein-1 alpha, interleukin-6 (IL-6), IL-8, 및 IL-11의 상당한 수준을 분비한다. 그러나 HS-5만이 외부 요인 없이 혈청이 제거된 배지에서 공동 배양할 때 혈구 모세포의 증식을 지원한다. HS-5의 조건화된 배지(CM)는 IL-1, IL-3, IL-6, G-CSF, GM-CSF 및 KL을 포함한 재조합 인자 혼합물 및 3 U의 에리트로포이에틴(Epo)이 포함된 것보다 조혈 세포 집단의 성장을显著하게 촉진한다. HS-23 및 HS-27의 두 개 추가 클론은 상피형 형태를 가진 "담요" 세포와 유사하며 HS-5 및 HS-21과 비교하여 훨씬 크고, 넓고, 평평하다. 이 세포주들은 낮은 수준의 성장 인자를 분비하며, 공동 배양에서 분리된 전구 세포의 증식을 지원하지 않는다. HS-23 및 HS-27의 CM도 조혈 세포 집단의 성장을 지원하지 않는다. HS-23과 HS-27 모두 상대적으로 높은 수준의 VCAM-1을 발현하지만, HS-27만이 분리된 CD34+38lo 세포에 의해 "자갈길" 영역의 형성을 지원하는 유일한 세포주이다. 우리는 HS-5, HS-21, HS-23 및 HS-27이 골수 미세환경의 기능적으로 구별되는 구성요소를 나타낸다고 가설한다.