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민감하고 견고한 HPLC-MS/MS 방법이 개발되고 검증되어, 단백질 침전을 사용하여 쥐 혈장에서 YWS22026과 그 주요 대사물 M3의 동시 측정을 가능하게 하였습니다. 크로마토그래픽 분리는 Shim-pack Scepter C18 컬럼(4.6 × 50 mm, 3 μm)에서 경량 용리 프로그램(모바일_phase A: 물에 0.2% 개미산; 모바일_phase B: 메탄올)으로 유속 0.9 mL/min에서 이루어졌습니다. 검출은 양성 전기분무 이온화(ESI+) 방식으로 다중 반응 모니터링(MRM) 모드에서 수행되었습니다. 이 방법은 탁월한 특이성, 정확성(상대 오차, %RE < 9.1%), 정밀도(상대 표준 편차, %RSD < 9.9%), 선형성(두 분석물 모두 5-2000 ng/mL)의 성능을 보였습니다. 정량의 하한(LLOQ)은 5 ng/mL이었습니다. 안정성 연구를 통해 플라스마 샘플이 다양한 저장 조건(실온에서 10시간, -20°C에서 22일, 세 차례의 동결-해동 사이클 및 4°C 자동 샘플러 저장에서 73시간)에서 안정성을 유지함을 확인하였습니다. 이 검증된 방법은 Sprague-Dawley 쥐에서 26주 동안의 동시 독성약동학 연구에 성공적으로 적용되었으며, YWS22026과 M3의 노출에 대한 성별 관련 차이를 발견하였습니다. 이러한 발견은 이후의 임상 시험에서 YWS22026의 안전성 평가에 중요한 통찰을 제공합니다.
Li et al. (Sun,)은 이 질문을 연구하였습니다.