다중 반응 모니터링을 이용한 면역글로불린 G 및 그 당변형체의 절대 정량화

당올리고당 바이오마커 발견을 목표로 하는 연구는 방출된 당올리고당의 글로벌 프로파일링을 통해 당올리고당 특성 분석에 초점을 맞추었습니다. 특정 부위의 당화 분석은 덜 개발되었지만, 더 높은 감도와 특이성을 가진 새로운 유형의 바이오마커를 제공할 수 있습니다. 펩타이드-결합 당올리고당의 정량화는 특정 단백질의 특정 부위와 관련된 다양한 당변형체의 차별 분석을 직접 용이하게 합니다. 우리는 절대 단백질 농도로 정규화된 단백질 당화를 모니터링하기 위해 MRM을 사용하는 방법을 개발하여 특정 부위 수준에서 당화의 정량적 변화를 조사했습니다. 이 새로운 접근법은 단백질의 절대 양과 특정 부위의 당화 프로파일에 대한 정보를 제공하므로, 혈청/플라즈마에서 변형된 당화 프로파일이 단백질 당화의 변화 때문인지 단백질 농도의 변화 때문인지 결정하는 데 유용할 것입니다. MRM의 놀라운 감도와 선택성이 저농도 IgG 당펩타이드를 검출할 수 있게 해 주며, 혈청에서 직접 IgG를 소화했을 때에도 액체 크로마토그래피 전 청소 과정 없이 가능합니다. 우리의 결과는 IgG 단백질 정량화에 대해 60 amol의 낮은 검출 한도와 3개의 차수의 넓은 동적 범위를 보여줍니다. 결과는 IgG 당펩타이드가 혈청에서 직접(an enrichment 없이) 분석될 수 있으며, 단백질 함량에 정규화될 때 더 정확한 풍부함을 제공함을 보여줍니다. 이 보고서는 생체 유체에서 당단백질과 그 당화 패턴을 정량화하기 위한 다중 반응 모니터링의 사용에 관한 지금까지의 가장 포괄적인 연구를 나타냅니다.