HL-60 세포에서 phorbol ester에 의해 유도된 빠른 단백질 인산화. 2차원 겔 전기영동에 의해 검출된 17,000달톤 단백질의 독특한 알칼리 안정 인산화.

백혈병 전단구 세포주 HL-60을 phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA)로 처리하면 세포가 단핵구로 터미널 분화된다는 것이 밝혀졌습니다. 우리는 이 효과가 2차원 겔 전기영동에 의해 검출된 17-kDa 단백질(pp17, pI 약 5.5)과 27-kDa 단백질(pp27, pI 약 5.5)의 인산화가 급격히 증가하는 것과 관련이 있음을 발견했습니다. 15분 내에 pp17의 인산화는 5-에서 7배, pp27은 3-에서 4배 증가했습니다. 인산화 속도는 PMA와 60분 동안의 배양 기간 동안 가속화된 상태를 유지했습니다. 이러한 특정 변화와는 대조적으로, 같은 기간 동안 HL-60 세포의 총 32Pi 포함에 대한 PMA의 영향은 없었습니다. pp17의 인산 에스터 결합은 전기영동 겔에 대한 알칼리 처리에 대해 놀라운 안정성을 보였지만, pp27은 그렇지 않았습니다. 그러나 인산아미노산 분석 결과, pp17과 pp27 단백질 모두가 세린 잔기에 대해서만 인산화되었음을 보여주었습니다. 이 두 인산화 단백질은 세포질에만 위치하며, 조막 원유 분획에서는 발견되지 않았습니다. 우리는 또한 여러 비활성 유도체의 phorbol ester가 pp17과 pp27의 인산화 증가를 유도하지 못한다는 것을 증명하여, 이러한 특정 인산화 사건이 PMA에 의해 HL-60 세포의 분화 유도와 밀접하게 관련되어 있음을 제안했습니다.