인슐린 수용체 베타 소단위체의 티로신 인산화는 수용체 관련 티로신 키나제 활성을 활성화한다.

인슐린-아가로스에 고정된 부분적으로 정제된 수용체를 사용하여 인슐린 수용체와 관련된 키나제 활성을 인산화 및 탈인산화로 조절하는 방법이 검토되었다. 고정된 수용체 준비물은 주로 티로신뿐만 아니라 세린 및 트레오닌 키나제 활성을 인슐린 수용체 베타 소단위체 및 외래 히스톤에 대해 나타낸다. 비표지 ATP의 농도가 증가함에 따라 인슐린 수용체 준비물을 인산화하고, 반응하지 않은 ATP를 제거하기 위해 세척한 후 히스톤과 감마-32PATP 존재 하에서 시험할 때 수용체 키나제 활성이 점진적으로 활성화된다. 수용체를 ATP 농도가 1 mM에 도달하도록 사전 배양하면 최대 4배의 활성화가 달성된다. 32P-표지된 인슐린 수용체 베타 소단위체의 트라이프틱 가수분해물에 대한 고압액체크로마토그래피 분석은 세 개의 인산화 영역(정점 1, 2 및 3)을 드러낸다. 이 세 개의 영역에서는 인산화 티로신 및 인산화 세린 잔기가 존재하며, 정점 2는 인산화 트레오닌도 포함한다. 따라서 인슐린 수용체 베타 소단위체에서 인산화에 사용할 수 있는 장소가 최소 7개 이상 존재한다. 15도에서 인슐린 수용체를 인산화된 상태로 알칼리성 포스파타제를 첨가해 배양하면, 수용체 베타 소단위체의 인산화 티로신 잔기에 대한 선택적 탈인산화가 발생하며, 인산화 세린 및 인산화 트레오닌 함량은 영향을 받지 않는다. 수용체의 탈인산화는 수용체 키나제 활성을 65% 감소시키는 현상과 동반된다. 알칼리성 포스파타제 처리 후 수용체의 32P 인산염 함량 감소의 거의 90%는 정점 2에서 인산화 티로신 함량의 감소로 설명된다. 반면 정점 1 및 3에서는 매우 미미한 감소가 관찰된다. 이러한 결과는 수용체 영역 2의 티로신 잔기의 인산화 정도가 수용체 키나제 활성 상태와 밀접하게 관련이 있음을 보여줍니다. 이는 이 영역의 인산화가 인슐린 수용체 티로신 키나제를 조절하는 데 중요한 역할을 할 수 있음을 시사한다.