January 1, 1981Open Access
View Full Paper샷건 DNA 시퀀싱을 위한 시스템
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Abstract
다목적 클로닝 사이트가 단일 가닥 DNA 파지 M13mp2의 베타-갈락토시다제(베타-D-갈락토사이드갈락토하이드롤라제, EC 3.21.23) 유전자에 합성 DNA를 사용하여 도입되었습니다. 이 사이트는 14개의 추가 코돈을 기여하며, lac 유전자 산물이 내부 크리스론 보완을 겪는 능력에 영향을 미치지 않습니다. 바이러스 유전자 II에 있는 두 개의 제한 효소 절단 사이트는 단일 염기 쌍 돌연변이에 의해 제거되었습니다. 새로운 파지 M13mp7을 사용하여, 다양한 제한 효소로 절단된 DNA 조각을 직접 클로닝할 수 있습니다. 클로닝된 DNA의 뉴클레오타이드 서열은 체인 종결제를 사용하고 새로운 제한 사이트 배열 앞의 15 염기에 상보적인 합성 올리고뉴클레오타이드 프라이머를 이용한 DNA 합성으로 신속하게 결정될 수 있습니다.