신호 서열이 내재질막에 삽입되는 루프 모델에 대한 증거.

단백질이 내재질막에 삽입되는 것은 보통 삽입 과정에서 절단되는 신호 서열이라고 불리는 짧은 소수성 도메인에 의해 매개됩니다. 우리는 신호 서열 앞에 N-말단 확장이 있는 소낭성 구내염 바이러스 당단백질을 암호화하는 DNA를 이전에 구성하였고, 이러한 확장이 정상적인 신호 서열 기능 및 생체 내 절단을 허용한다는 것을 보여주었습니다. 막 삽입 동안 신호 서열의 위상을 분석하기 위해, 우리는 이러한 신호 서열의 절단을 차단하는 점 돌연변이를 생성하였습니다. 이러한 단백질을 HeLa 세포에서 발현한 후, 미세소포막의 단백질 분해를 사용하여 신호 서열의 N 말단과 각 단백질의 C 말단이 삽입 후 내재질막의 세포질 쪽에 남아 있다는 것을 확인하였습니다. 이 결과는 단백질이 루프 형태로 삽입되었음을 나타냅니다. 이러한 발견을 확장하여, 정상적인 C-말단 막 관통 및 세포질 도메인을 삭제함으로써 그러한 돌연변이 단백질의 방향을 반전시킬 수 있었습니다. 신호 서열이 막 앵커로 기능할 수 있음을 보여주는 것 외에도, 이러한 발견은 절단 부위를 제외하고는 I형 막 관통 단백질의 절단된 신호 서열이 II형 막 관통 단백질의 절단되지 않은 신호 서열과 구조적 및 기능적으로 동등함을 보여줍니다.