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단일클론 항수용체 항체를 사용하여 단백질 A 세파로스에 흡착하여 면역정제한 L 세포 글루코코르티코이드 수용체를 사용하여 스테로이드 결합 능력 유지를 위한 요구사항을 연구하는 분석법을 개발하였습니다. 면역흡착에 의한 빠른 정제 후, 이종수용체 복합체는 글루코코르티코이드 호르몬을 결합하는 능력을 유지합니다. 수용체 복합체가 20도 C에서 가열되면, 스테로이드 결합 능력이 상실되고, 90-kDa 열충격 단백질(hsp90)이 수용체에서 분리됩니다. hsp90의 온도 및 염분 의존적 해리 속도는 호르몬 결합 활성 감소 속도와 유사합니다. 몰리브데이트와 과산화수소는 온도 의존적 해리에 대해 hsp90-수용체 복합체를 안정화합니다. 그러나 몰리브데이트는 과산화수소보다 스테로이드 결합 능력을 안정화하는 데 훨씬 더 효과적입니다. 몰리브데이트나 과산화수소가 없는 상태에서 비활성화된 수용체는 재활성화할 수 없습니다. 스테로이드 결합 능력의 비활성화는 환원제의 유무와 관계없이 발생하며, 비활성화는 수용체 절단이나 탈인산화와 동반되지 않습니다. 어떤 조건에서도 hsp90이 없는 수용체는 스테로이드를 결합하지 않습니다. hsp90에 결합된 수용체는 몰리브데이트가 있는 상태에서 hsp90과 스테로이드 결합 활성을 유지하며 27-kDa 메로수용체로 절단될 수 있습니다. 이러한 관찰 결과는 hsp90이 유능한 고친화성 글루코코르티코이드 결합 부위를 유지하는 데 필요하지만 충분하지 않다고 제안하게 합니다. 비록 27-kDa 메로수용체 조각이 유능한 결합 부위로서는 충분하지 않지만, hsp90과 결합된 경우에는 충분합니다.
Bresnick 외. (수), 이 질문을 연구하였습니다.