세마포린 5A가 흑색종 진행을 주도합니다: Bcl-2, miR-204 및 c-Myb의 역할

배경: 흑색종은 가장 공격적인 형태의 피부암으로, 전이율이 높고 약물 저항성과 사망률이 특징입니다. 여기서 우리는 세마포린 5A(Sema5A)가 흑색종 진행과 관련된 특성 및 Sema5A 조절에 관련된 요인들에 미치는 역할을 조사했습니다. 방법: 웨스턴 블랏, qRT-PCR, 크로마틴 면역 침전(ChIP) 분석, 흑색종 환자 샘플 및 이식조직의 면역조직화학, 세포 이동 및 침습 평가를 위한 인비트로 트랜스웰 분석, 인비트로 모세혈관 구조 형성 분석. 결과: GEO 프로파일 데이터셋 분석을 통해 Sema5A mRNA 발현과 흑색종 진행 간의 유의한 상관관계를 관찰했습니다. 검사된 인체 흑색종 세포주 95%에서 내인성 Sema5A 단백질이 검출되었고, 흑색종 환자의 전이 샘플 70%에서, 16%의 제자리 흑색종 샘플에서 국소적인 양성 반응을 보였습니다. Sema5A가 인비트로 세포 이동 및 침습을 조절하고 혈관형성 구조의 형성을 조절한다는 것을 입증했습니다. Bcl-2의 강제 발현 후 Sema5A가 mRNA 및 단백질 수준에서 증가하는 것을 발견했습니다. 전사 및 프로테아좀 억제제를 사용하여 Bcl-2가 Sema5A mRNA와 단백질의 안정성을 증가시킨다는 것을 보여주었습니다. 또한, ChIP 분석을 통해 Sema5A 발현이 전사 인자 c-Myb에 의해 조절되고 Bcl-2 과발현 후 Sema5A 프로모터에 대한 c-Myb의 모집이 증가한다는 것을 입증했습니다. 마지막으로, miR-204 과발현 후 흑색종 세포에서 Sema5A, Bcl-2 및 c-Myb 단백질의 발현이 동시에 감소하는 것을 관찰했습니다. 결론: 전반적으로 우리의 데이터는 Sema5A가 흑색종 진행에서 역할을 한다는 것과 Bcl-2, miR-204 및 c-Myb가 그 발현 조절에 관여한다는 것을 지지하는 증거를 제공합니다.