Hsp90 샤페론 야생형 p53 종양 억제 단백질

불멸화된 인간 섬유아세포를 사용하여 Hsp90 분자 샤페론과 야생형 p53 종양 억제 단백질 간의 가정된 상호작용을 조사하였다. 우리는 Hsp90의 특정 억제제인 겔다나마이신 또는 라디시콜이 특정 야생형 p53의 p21 프로모터 서열 결합을 감소시킨다는 것을 보여준다. 결과적으로, 이러한 억제제는 p21 mRNA 수준을 감소시켜 세포주기 정지를 유도하는 것으로 알려진 세포 내 p21/Waf1 단백질을 감소시킨다. 대조 실험에서 우리는 겔다나마이신이나 라디시콜이 p53 mRNA 수준에 영향을 미치지 않는다는 것을 보여준다. 인히비터로 인간 섬유아세포를 처리한 후 p53 단백질 수준의 미세한 감소는 Hsp90이 야생형 p53의 안정화에 잠재적으로 관여할 수 있음을 나타낸다. 우리의 생체 내 결과를 지원하기 위해, 우리는 Hsp90의 야생형 p53과 p21 프로모터 서열 결합에 미치는 영향을 조사하기 위해 고도로 정제된 재조합 단백질을 사용한 재구성 시스템을 사용했다. 인간 재조합 Hsp90 알파 이소폼과 소의 뇌 Hsp90가 동질적으로 정제되었다. 이 두 가지 분자 샤페론은 ATPase 활성을 보이며, 겔다나마이신 및 라디시콜에 민감하게 열 불활성화된 루시퍼레이스를 재접기 할 수 있는 능력을 가지고 있어, 번역 후 수정이 Hsp90alpha 활성을 조절하는 데 관여하지 않음을 시사한다. 우리는 37도 C에서 재조합 p53을 인큐베이션하면 야생형 형태의 수준이 감소하고 p53의 p21 프로모터 서열에 대한 인 vitro 결합을 강하게 억제한다는 것을 보여준다. 흥미롭게도, Hsp90은 생리학적 온도 37도 C에서 인큐베이션 후 p53 DNA 결합을 긍정적으로 조절할 수 있다. Hsp70 및 Hsp40 계열의 다른 재조합 인간 샤페론들은 이 반응에서 Hsp90을 효율적으로 대체할 수 없었다. 생체 내 결과와 일치하게, 겔다나마이신은 p53 DNA 결합을 프로모터 서열에 대한 Hsp90의 조절 능력을 억제할 수 있다. 요약하자면, 이 기사에서 제시된 결과는 Hsp90의 샤페론 활동이 유전자형 야생형 p53의 전사 활성을 위해 중요하다는 것을 나타낸다.