마이오튜브 분석기: 근육 줄기세포에서 근원성 특성을 평가하는 방법

배경: 생검을 통해 얻은 인체 성인 근육 줄기세포의 인 비트로 배양 분석은 골격근의 잠재력을 드러내며 환자의 변형된 근육 형태를 이해하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이러한 분석에서 융합 지수는 근육 줄기세포의 근원성을 평가하는 일반적으로 사용되는 정량적 지표입니다. 융합 지수는 근원성을 부분적으로만 설명하므로, 우리는 위성 세포 배양에서 얻은 마이오핵과 마이오튜브의 추가 특성과 융합 지수의 정의를 결합하는 Myotube Analyzer 도구를 개발했습니다. 결과: 이 소프트웨어는 전처리 및 반자동 세분화를 위한 이미지 조정 및 마스크 편집 기능을 포함하고 있으며, 다른 기능은 핵과 마이오튜브의 특성을 결정하는 데 사용할 수 있습니다. 융합 지수와 새로운 매개변수 다섯 세트는 뇌성 마비 아동과 일반 아동의 위성 세포 배양 비교에서 신뢰성 및 타당성을 테스트했습니다. 이 새로운 매개변수들은 추가의 핵과 마이오튜브 특성을 정량화하였으며, 핵 군집화와 마이오튜브 형태를 설명하는 데 사용될 수 있습니다. 세포 배양 교육을 받은 두 명의 분석가가 Myotube Analyzer 앱을 사용하여 모든 매개변수를 정의했습니다. 여섯 가지 매개변수 중 다섯 개는 좋은 신뢰성을 나타내었고, 이는 높은 군내 상관 계수 (> 0.75)로 반영되었습니다. 뇌성 마비 아동은 다섯 가지 매개변수에 대해 일반 아동과 유의미한 차이를 보였으며 (p < 0.05), 여섯 매개변수 중 세 가지는 이러한 차이가 최소 탐지 가능한 차이를 초과했습니다. 결론: Myotube Analyzer는 핵 및 MyHC 염색이 있는 고정된 분화된 미오블라스트 배양 분석에 사용될 수 있습니다. 이 앱은 이미 존재하는 매개변수인 융합 지수를 계산할 수 있지만, OUTPUT에서 근원성을 포괄적으로 설명하기 위해 여러 새로운 매개변수도 제공합니다. 이러한 매개변수를 결정하는 데 사용된 원시 데이터는 OUTPUT에서도 사용할 수 있습니다. 툴에 의해 계산된 매개변수는 뇌성 마비 아동과 일반 아동의 배양 간의 차이를 감지하는 데 사용할 수 있습니다. 이 프로그램은 오픈 소스이므로 사용자들은 자신의 분석 요구에 맞게 맞춤화할 수 있습니다.