전사 염기서열 결정: RNA 중합효소를 이용한 DNA 염기서열 결정 방법

우리는 3'-탈옥시뉴클레오타이드 트리포스페이트(3'-dNTP)에 로다민 염료가 부착된 RNA 중합효소 체인 종결 반응에 기반한 염기서열 결정 방법을 개발했습니다. 이 방법은 <30분 내에 빠른 이소열 염기서열 반응을 수행할 수 있도록 하고, 필요한 템플릿 양을 줄이며, Sanger 염기서열 반응을 방해하는 프라이머와 2'-dNTP를 제거하지 않고 PCR 직접 염기서열 결정을 가능하게 합니다. 새로 설계된 4색 염료-3'-dNTP와 3'-dNTP의 통합률이 향상된 변형 RNA 중합효소 덕분에 정확하고 긴 리드 길이를 구현할 수 있었습니다. 이 방법은 유전체 프로젝트 및 임상 진단을 위한 대규모 염기서열 결정에 유용할 것입니다.