토끼 골격근 인산화효소 키나제의 초기 자가인산화 사건의 특성화.

pH 8.0에서 비활성화된 토끼 골격근 인산화효소 키나제의 초기 자가인산화는 베타 서브유닛의 인산화와 밀접하게 평행하는 효소 활성을 증가시켰습니다. 펩타이드 맵은 자가인산화 동안 베타 서브유닛에 통합된 첫 번째 인산이 cAMP 의존 단백질 키나제에 의해 인산화된 인산화효소 키나제에서 이전에 분리된 동일한 트립타이드 펩타이드에 있었다고 밝혔습니다 (Cohen P., Watson, D.C., and Dixon, G.H. (1975) Eur. J. Biochem. 51, 79-92). 인산화효소 키나제와 1분 동안 미리 배양했을 때, Ca2+와 Mg2+는 pH 6.8에서 후속 자가인산화를 시너지적으로 자극했습니다. 이 처리 후 알파와 베타 서브유닛의 인산화는 선형적이 되었고, pH 6.8에서 베타 서브유닛의 첫 번째 인산화 부위는 pH 8.0에서 인산화된 첫 번째 부위에 해당했습니다. 금속 이온의 시너지 작용으로 인해 지연이 제거됨으로써 최초 자가인산화 동안 pH 6.8 또는 8.2에서 MgATP의 Km을 약 20 마이크로M으로 결정할 수 있었습니다. 기질로서 인산화효소 b를 사용할 때 동일한 조건에서 MgATP의 Km 값은 pH 6.8과 8.2에서 각각 약 30과 60 마이크로M으로 측정되었습니다. 인산화효소 키나제 농도에서 30배 범위에 걸친 자가인산화의 초기 속도는 알파 베타 감마 델타 4량체당 처음 1~2 몰의 인산 통합이 분자 내 기전으로 발생함을 시사합니다.