비조사법 인사이트 하이브리드화에 의한 띠가 있는 중기 염색체에서 단일 복사 유전자의 직접 시각화

비조사법 인사이트에서 단일 복사 유전자를 G-띠 염색체에서 "원스텝" 일반 광학 현미경을 통해 직접 매핑하는 빠른 방법이 설명된다. 이것은 비오틴화된 프로브를 중기 염색체에 하이브리드화하는 것을 기반으로 한다. 비오틴 잔기는 토끼 항비오틴 항체 및 과산화효소 또는 콜로이드 금으로 표지된 항토끼 Ig에 의해 검출된다. 과산화효소 반응 생성물 또는 콜로이드 금 신호는 은 침전을 통해 증폭된다. 최종 생성물은 보라색 G-띠 염색체의 유전자 위치에 검은색 은 점이다. N-ras 및 alpha-1-antitrypsin 유전자는 각각 1p13.1 및 14q31/32의 1.5 및 1.3kb 삽입물이 있는 플라스미드를 사용하여 매핑되었다. 이 실험에서 신호 대 잡음 비율은 32:1-46:1 범위였다. 이 기술은 방사성 동위원소 인사이트 하이브리드화만큼 민감하며 하이브리드화 후 1일 이내에 결과를 제공하며 훨씬 더 나은 해상도를 가진다. 추가적으로, 유전자는 반사 대조, 형광 또는 위상 현미경과 같은 특수 기술 없이 일반 광학 현미경으로 시각화된다. 이 방법론은 보다 정밀한 염색체 유전자 위치 지정을 촉진해야 한다.