리소좀에 대한 연구

인간 림프구의 순수한 현탁액은 나일론 울을 이용하여 말초 혈액으로부터 분리하여 0.34 M의 자당-0.01 M EDTA 용액에서 균질화한 후, 차등 원심분리로 분획하였다. 산성 가수분해 효소 활성이 대부분 20,000 g x 20 분의 고형분획에 농축되어 있는 반면, 핵, 잔여물 및 상등액 분획은 덜 농축된 가수분해 효소를 포함하고 있었다. 고형분획에 존재하는 산성 가수분해 효소 활성은 스트렙톨리신 S, 필리핀 및 리소레시틴과 같은 막 파괴제를 노출한 후 20,000 g x 20 분의 상등액으로의 용량 의존적인 방출에 의해 적절한 '지연'을 나타냈다. 헤파린은 재현 가능한 균질화 및 세포 분획화를 얻기 위해 현탁 매체에서 필요함이 입증되었다. 림프구 현탁액의 혈소판에 의한 과도한 오염조차도 림프구 균질화물의 산성 가수분해 효소 활성이거나 세포 소기관 내 효소의 분포를 실질적으로 변화시키지 않았다. 산성 가수분해 효소가 풍부한 세포 소기관과 미토콘드리아가 포함된 500 g x 10 분의 상등액의 불연속적인 밀도 기울기 원심 분리는 산성 가수분해 효소가 풍부한 세포 소기관을 미토콘드리아로부터 부분적으로 분리하는 결과를 가져왔다. 온전한 림프구의 미세 구조 연구는 산성 인산분해 효소 양성의 막 경계 세포 소기관의 존재를 보여주었다. 이러한 림프구의 '대립' (20,000 g x 20 분) 분획의 전자현미경 검사는 80-90%의 미토콘드리아, 5-10%의 혈소판 및 5-10%의 막 경계 산성 인산분해 효소 양성 구조를 나타냈다. 데이터는 인간 말초 혈액 림프구에 다른 조직의 리소좀과 유사한 생화학적 및 구조적 특성을 가진 산성 가수분해 효소가 풍부한 과립이 존재함을 나타낸다.