장내 미세융모 110K-칼모듈린 복합체의 마이오신 유사 110-kD 하위 단위의 구조적 및 면역학적 특성: 이산 마이오신 머리 및 칼모듈린 결합 영역에 대한 증거.

장내 솔잎 경계의 각 미세융모 내에서 액틴 다발은 나선형으로 배열된 다리들에 의해 막에 측면으로 연결되어 있습니다. 이 다리는 110-kD 하위 단위와 다수의 결합된 칼모듈린(CM) 분자로 구성된 단백질 복합체로 이루어져 있다고 생각됩니다. 최근 연구에 따르면, 이 복합체는 110K-CM이라고 불리며 액틴 결합 및 ATP 효소 특성에 있어 마이오신 유사성을 지닌 것으로 나타났습니다. 이 연구에서는 110-kD 하위 단위와 마이오신 간의 가능한 구조적 유사성을 두 세트의 단클론 항체(mAbs)를 사용하여 조사하였습니다; 하나는 Acanthamoeba myosin II에 대해 생성되었고 다른 하나는 조류 110K-CM의 110-kD 하위 단위에 대해 생성되었습니다. 마이오신 II mAbs는 이전에 골격근 마이오신과 교차 반응성이 있는 것으로 보여졌으며, 이 에피토프는 하위단편-1(S1) 영역의 50-kD 트립틱 조각에 국한되어 있었습니다. 110K mAbs(CX 1-5)는 110-kD 하위 단위와 골격근의 무거운 사슬과 반응했으나 매끈근 또는 솔잎 마이오신의 사슬과는 반응하지 않았습니다. 이 다섯 개의 110K mAbs 모두 닭 골격 S1의 25-kD NH2-말단 트립틱 조각과 반응했으며, 이 조각은 마이오신의 ATP 결합 사이트를 포함하고 있습니다. 110K-CM의 유사한 트립틱 소화는 이 다섯 개의 mAbs가 110K의 36-kD 조각(뿐만 아니라 더 큰 90- 및 54-kD 조각) 모두와 반응했음을 보여주었으며, 사진 친화성 표지를 통해 110K 하위 단위의 ATP 결합 사이트가 포함되어 있음을 확인하였습니다. CM이 110K-CM의 같은 트립틱 소화물에 결합된 경우, 오직 90-kD 조각만이 ATP 및 CM 결합 영역을 모두 유지함을 보여주었습니다. 여러 개의 60, 40, 29 및 18 kD 트립틱 조각에서 CM 결합이 관찰되었으나 이들 조각은 마이오신 머리 에피토프를 포함하지 않았습니다. 이러한 결과는 ATP 및 액틴 결합에 관련된 영역을 포함하여 110K와 마이오신 S1 간의 구조적 유사성을 제안하며, 110K-CM이 마이오신이라는 추가적인 증거를 제공합니다. 이러한 연구는 또한 Coluccio와 Bretscher(1988. J. Cell Biol. 106:367-373)의 결과를 지지하여 110-kD 하위 단위의 칼모듈린 결합 사이트와 마이오신 머리 영역이 분리된 기능적 영역에 위치한다는 것을 보여줍니다.