황백 조류 배아 연골에서 이황화 결합 콜라겐 폴리펩타이드가 포함된 세 번째 프로테오글리칸(PG-Lt)의 분리 및 특성화

황백 조류 배아의 관절 연골은 세 가지 서로 다른 프로테오글리칸 종(PG-H, PG-Lb, PG-Lt)을 포함하고 있는 것으로 나타났습니다. 이 보고서는 세 번째 프로테오글리칸인 PG-Lt의 정제 및 특성화에 관한 것입니다. 프로테오글리칸은 CsCl 밀도 기울기에서 상대적으로 낮은 부력 밀도로 다른 두 종과 분리될 수 있으며, 추가적으로 연속 이온 교환 및 젤 크로마토그래피를 통해 정제됩니다. 최종 준비물은 PG-Lt 단량체와 PG-Lt 올리고머로 구성되어 있습니다. PG-Lt의 아미노산 조성은 PG-H와 PG-Lb와 상당히 다르며, 글리신의 높은 함량과 프롤린 및 라이신의 높은 수산화 정도에 관한 한 콜라겐과 유사합니다. PG-Lt 단량체는 2-머캅토에탄올로 환원한 후의 젤 전기영동 거동에 의해 나타난 Mr이 120,000 및 190,000에 해당하는 이황화 결합 하위 단위로 구성됩니다. 후자는 피부당황산 체인을 포함하며, 글루쿠론산/이드루론산 잔기를 포함하고, 칸드로이틴 효소 ABC로 소화한 후 Mr이 100,000에 해당하는 단백질 풍부한 핵심 분자를 생성합니다. 두 단백질 하위 단위 모두는 박테리아 콜라겐 분해효소로 완전히 소화됩니다. PG-Lt에 대한 항체를 사용한 연골 조직의 면역 형광 현미경 검사 결과, 이 프로테오글리칸이 연골 기질과 연골 조직이 없는 주변 지역 모두에 존재함을 보여줍니다. 연골 세포가 조직 배양 접시에 배치될 때 항체는 세포 표면과 기질에 부착된 세포 층의 세포 간 공간에서 발견되는 가닥을 염색하여 PG-Lt가 세포 간 및 세포와 기질 간 접촉을 매개함을 제안합니다.